浅谈水厂微生物在线强化系统检测质量控制

2019-09-11 11:45:46
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  微生物实验室要求通风良好、避免灰尘、过堂风和温度骤变,保持室内空气高度洁净和实验器具的整洁,所以今天小编带大家浅谈水厂微生物在线强化系统检测质量控制,注意应每天进行清扫整理、保持桌柜台面无尘、杜绝污染。实验室应布局合理并进行分区,即培养基制备区、灭菌区、无菌室等。仪器、实验器皿要摆放合理,并有固定位置。测试用过的废弃物要放置在固定位置,并及时处理。

  1、环境和设施的质量控制

  无菌室由缓冲间、操作间组成,应采光良好、避免潮湿、远离厕所及污染区;墙壁与地面、天花板连接处应无缝隙,不留死角。缓冲间和操作间必须设置紫外线消毒灯;操作间和缓冲间门不宜正对,两者之间应有具备灭菌功能的样品传递窗。在缓冲间应有无菌衣裤放置架及挂钩,拖鞋等,不应放置培养箱和其他杂物;操作间内不应安装下水道,只能放置必要物品,如无菌操作台、酒精灯等,其他实验用品用完后即应移出。

  每周对无菌室进行清洁,用无菌室专用清洁用品如抹布、盆、地拖等,对传递窗、缓冲间、操作间进行清洁、整理。紫外线消毒至少30 min。

  每天实验前用紫外灯照射无菌室、无菌操作台至少30 min对进行消毒。开启无菌操作台风扇10 min~30min后才入内工作。

  水厂微生物在线强化系统检测质量控制应每月对无菌室空气洁净度监测一次,监测方法为自然沉降法:无菌室清洁消毒完毕后,进行无菌室中空气微生物采样,设五个采样点,无菌室内四个墙角对角线交点为一个采样点,该点与四个墙角连线的中点为四个采样点,采样高度为操作台高度,在无人条件下,用9CM的无菌营养琼脂培养基平皿在采样点暴露30 min,于36℃培养48小时,对生长的菌落计数,平均菌落数≤3CFU为合格,若平均菌落数>3CFU,则应查找原因进行整改并重新进行采样监测。

  2、仪器设备的质量控制

  微生物检测仪器设备应有专人保管,使用要有记录,要定期检查其性能,确保仪器的适用性和准确性。微生物检测常用仪器设备主要有高压灭菌器,电热恒温干燥箱,电热恒温培养箱,恒温水浴锅、电冰箱,显微镜,紫外灯等。

  高压灭菌器应请有资质的计量检定机构定期进行校准,校准周期一般为半年。高压灭菌器应由专人按照作业指导书操作,并做好每一次的使用记录。高压灭菌器使用时,内置物品不能太多,在水厂微生物在线强化系统检测质量控时单位体积内的内容物(每瓶内的培养基)不能太多,同时应注意内容物不同耐受温度。高压灭菌器的消毒效果可通过化学指示带(或化学指示带条)进行检测。

  电热恒温干燥箱、电热恒温培养箱、电冰箱等仪器在日常工作中应进行温度监控,将校准过的温度计置于干燥箱体内,以观察其温度是否符合要求,恒温准确。电热恒温干燥箱、电热恒温培养箱的校准周期一般为一年。

  冰箱内的物品必须标明名称、配制日期、有效期等,应对冰箱进行温度监控(1次/天),并定期进行清理。

  3、玻璃器皿、器材的质量控制

  培养皿、吸管、试管等玻璃器皿,应剔除破损和有气泡的,新购的器皿应在2%的盐酸中浸泡数小时,用自来水冲洗干净再用蒸馏水冲洗1~2次,晾干备用。培养后的玻璃器皿应经高压或高温灭菌后及时清洗。对需使用的灭菌器皿、器材应当正确采取灭菌措施,应当有明显的标识对无菌和非无。器皿、器材加以区分。

  培养皿是微生物实验的主要耗材,因此对其的无菌效果的控制也是很重要的,在检测菌落总数时,打开一个空培养皿倾入15ml无菌营养琼脂培养基,与样品同时进行培养,合格的培养皿不应检出菌落。

  取样用的消毒瓶也必须进行消毒效果控制,对一般每批次经高温干热消毒的烘箱的不同层面随机抽取2个采样瓶,进行菌落总数检测,向每个瓶中加入5ml无菌水,涮洗瓶内壁后取1ml入15ml无菌营养琼脂培养基,于36℃培养48小时,不得检出菌落。

  4、培养基的质量控制

  培养基是微生物检测的关键实验材料,实验室必须采取一定的方法对培养基进行质量检查,以确保其有效性。瓶装干粉培养基的应按照其保存要求进行存放,应避免阳光直接照射,在有效期内使用,如发现培养基结块或变质,应立即停止使用。

  自配制培养基时,在水厂微生物在线强化系统检测质量控制时,要严格按照检测方法介绍的配方准确配制;使用商品合成培养基时,严格按照厂商提供的使用说明书配制。培养基配完后要及时灭菌,并记录配制日期、名称、配制方法、成分、用量(质量、体积)、pH、灭菌方法、配制人等。配制好的培养基可进行外观检查,液体培养基应该清澈,含倒管的倒管内应该液体充盈、无气泡;固体培养基应保持适当的硬度、接种前无菌落。

  每批配制好的培养基应进行阴性无菌实验(空白实验)和阳性对照实验,实验合格后才能使用。一般为随机抽取配好的培养基进行实验,阴性无菌实验就是进行空白实验,阳性对照实验可以用已知污染的水样,如含大肠菌、耐热大肠菌的原水等来测试培养基。培养基的空白实阴性无菌实验(空白实验)应无任何菌落生长,阳性对照实验应生长典型菌落或能够产酸产气,就说明该批培养基符合要求,可以使用。

  不同种类的培养基保存时间不同,但配制好的培养基,不宜保存过久,以少量勤配制为宜。GB/T 5750-2006要求,品红亚硫酸钠培养基4℃储存两周;MFC培养基在2℃~10℃下保存不超过96h。

  5、检测人员的管理

  检测人员应经培训,掌握微生物检测相关理论基础知识和操作技能。应该有严肃认真的工作态度,精密细致的操作技术和整齐清洁的良好习惯。有条件的实验室可以采用微生物质控样进行人员考核,或参加有关机构组织的实验室能力验证。也可以对检测人员在实验室内部开展一些比对活动,如人员比对、检测全过程比对、菌落平板计数比对等,以提高检测人员的检测技术水平。

  6、检测过程的控制

  由于微生物是肉眼看不见的,并且广泛分布于室内外的空气、水和土壤中;桌、椅和板凳的表面;衣服以及身体的皮肤等处。在进行浅谈水厂微生物在线强化系统检测质量控制时,需要进行微生物检测需要严格的无菌环境及无菌操作,才能保证检测结果真实的反映水样中微生物的含量。在微生物检测时应从采样开始进行全过程的质量控制,以确保检测结果的可靠性。

  当同时采集几类检测指标的水样时,应先采集检验微生物指标的水样,且应在采样前对水龙头进行消毒,并避免手指和其他物品对瓶口的沾污。水样在0℃~4℃避光保存,4小时内检测。

  进行微生物检测操作时,应清洁双手后进入缓冲间更衣、换上消毒隔离拖鞋,进入无菌室。进行无菌操作前先用消毒酒精消毒双手,再在洁净的操作台上进行操作;移加水样及倾倒培养基都应在酒精灯前完成;移加水样用的无菌移液管在使用前要经过酒精灯外焰灼烧再次灭菌;倾倒培养基前也应将盛培养基的容器口于酒精灯外焰灼烧灭菌。实验完后清洁操作台,将使用物品带出。

  培养时培养箱不能放得太满,保留一定空隙以保证空气流动,使培养物的温度尽可能与培养箱温度达到一致,培养皿每垛最多堆放6个。

  小结

  微生物检测需要严格的无菌环境及无菌操作,才能保证检测结果真实的反映水样中微生物的含量。因此,水厂实验室必须牢固树立检测质量意识,采取相应质量控制措施,制定并完善质量控制相关制度,在水厂微生物在线强化系统检测质量控制方面,只有持之以恒将质量控制工作落到实处。只有这样才能确保准确无误的检测结果,才能保证供水水质的卫生安全。

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